In vitro and in vivo antifungal activity, liver profile test, and mutagenic activity of five plants used in traditional Mexican medicine

Berberis hartwegii Benth., Berberidaceae, Hamelia patens Jacq., Rubiaceae, Dendropanax arboreus (L.) Decne & Planch., Araliaceae, Erythrina herbacea L., Fabaceae, and Zanthoxylum caribaeum Lam., Rutaceae, acetone extracts were selected on the basis of their use in traditional Mexican medicine to treat scabies or skin diseases. Anti-dermatophyte activity in vitro was evaluated using the agar dilution assay, and the therapeutic efficacy of B. hartwegii and Z. caribaeum were tested against experimental tinea pedis. The infected animals were treated intragastrically daily for seven days with 2.5 and 5 mg/kg of acetone extracts. The acetone extract of H. patens exhibited 100% growth inhibition against T. mentagrophytes and E. floccosum at 100.0 and 50.0 µg/ml, respectively, and B. hartwegii inhibited growth of M. canis and T. mentagrophytes at 100.0 µg/ml. Effective treatments with 2.5 mg/kg of Z. caribaeum and B. hartwegii extract were comparable with 1 mg/kg of clotrimazole in mice. Liver profile tests and histological analyses did not exhibit any signs of toxicity and the Ames test indicated that both extracts were safe when evaluated in strains TA98, TA100 and TA102. Our results suggest the potential for the future development of new antifungal drugs from B. hartwegii or Z. caribaeum.

Etiología de la infección cérvico vaginal en pacientes del Hospital Juárez de México / Etiology of cervicovaginal infection in Mexican women

OBJETIVO: Conocer la etiología de la infección cérvico vaginal, con el fin de establecer un diagnóstico acertado que permita ofrecer a las pacientes el tratamiento más apropiado. MATERIAL Y MÉTODOS: De enero de 1995 a diciembre de 1999 se realizó un estudio bacteriológico a 6 811 muestras de exudado cérvico vaginal de pacientes del Hospital Juárez de México, de la Ciudad de México, con edades comprendidas entre los 13 y los 65 años, que referían leucorrea, prurito, hiperemia y dolor abdominal bajo. RESULTADOS: La frecuencia de infección por cada germen fue G vaginalis, 22.65 por ciento, Candida spp, 19.13 por ciento, C albicans, 7.8 por ciento, T vaginalis, 1.5 por ciento, Streptococcus del grupo D, 11.78 por ciento, Streptococcus b haemolyticus, 4.59 por ciento, E coli, 13.46 por ciento, Klebsiella ssp, 2.0 por ciento, además de otras enterobacterias menos frecuentes como Citrobacter spp, Enterobacter spp, Pseudomonas spp, M morganii y P mirabilis. El 2.9 por ciento presentó anaerobios siempre asociados con G vaginalis. Se aislaron Neisseria spp y N weaveri en 0.15 por ciento de las muestras. La N gonorrhoeae no se encontró en ningún caso. Datos comparativos indican que, tanto Streptococcus hemoliticos como E coli tuvieron un marcado incremento en los dos últimos años, siendo el de esta última estadísticamente significativo (p<0.001). El método de ji cuadrada se aplicó para la evaluación de los datos. CONCLUSIONES: Considerando la diversidad de la etiología de la infección se recomienda realizar cultivos de la secreción cérvico vaginal a todas las pacientes con sintomatología sugestiva de ella.

Frecuencia de colicina y hemolisinas en Escherichia coli aisladas de pacientes embarazadas con infección de vías urinarias, sintomática y asintomática / Colicin and hemolisins in Eschirichia coli isolated from pregnant patients with symptomatic and asymptomatic urinary tract infections

Se estudió la frecuencia de producción de colicinas en 137 cepas provenientes de pacientes embarazadas con infección de vías urinarias (IVU), sintomática y asintomática. La frecuencia observada de cepas de E.coli uropatógenas, colicinogénicas aisladas en el primer grupo fue de 72.96 por ciento (n=96) mientras que en el segundo fue de 29.26 por ciento (n=41). Entre las cepas aisladas del grupo de pacientes sintomáticas, las colicinas encontradas con más frecuencia fueron: colicina V (23.9 por ciento), A (18.75 por ciento) y E1 (17.7 por ciento) y entre las cepas aisladas de población con infección asintomática, se identificaron con más frecuencia: colicina A (9.75 por ciento), E1 (17.0 por ciento) y V (2.4 por ciento). La frecuencia más elevada de colicina V en cepas provenientes de población sintomática con respecto a las aisladas en el grupo de pacientes asintomáticas, fue estadísticamente significativa (p = 0.025). Analizando la frecuencia de colicinas E1 y A, no se encontraron diferencias estadísticamente significativas. Entre las 137 cepas de E. coli estudiadas, se encontró que 37 por ciento de las mismas producen hemolisinas, observándose que 83.3 por ciento (n=24) de las cepas productoras de colicina V fueron hemolíticas mientras que 34 por ciento (n = 58) de cepas productoras de otras colicinas fueron hemolíticas y 12.7 por ciento (n=55) de las cepas hemolíticas no son colicinogénicas. Analizando los diferentes grupos productores de colicinas y hemolisinas se observa que estos resultados fueron estadísticamente significativos (p > 0.005). Los resultados presentados en este trabajo, sugieren que la producción de colicina entre cepas de Escherichia coli es un factor importante de patogenicidad, así como la asociación de hemolisina y colicina V, que puede favorecer que la infección de vías urinarias producida, se presente en forma de una infección sintomática.

Genotoxic evaluation of Norfloxacin and Pipemidic acid with the Eschirichia coli PolA-/polA+ and the ames test

Background. Genotoxicity of antibiotic has not been well evaluted, and there is not much information on the genetic risk of quinolone drugs, even though they are widely used as alternative choice drugs in urinary infections. Methods. Pipemidic acid and norfloxacin were tested for their capacity to induce point mutations using the Ames test and DNA damage on Escherichia coli PolA-/PolA+. Results. At non-toxic doses, all of the drugs studied were negative on the E. coli PolA-/PolA+ test with or without in vitro metabolic activation with induced arochlor 1254 rat liver (S9). They did not procedure frameshift mutations in TA98, or base-air substitutions in S. typhimurium hisG46 strains TA100, or UTH8414. Norfloxacin and its induced metabolites in vitro with S9 rat liver were mutagenic to hisG48 strains TA102 and TA104, both of which detect oxidative chemicals. Pipemidic acid induced mutations in S. typhimurium hisG48 strains only when they had an efficient DNA excision repair system. Conclusions. These results suggest that the risk of oxygen-free radical generation from quinolones should be considered

Valoración de riesgo genotóxico de exposición a citrato de clomifeno, con diferentes sistemas de prueba bacterianos / Genotoxic risk evaluation of exposure to clomiphene citrate with different bacterial test systems

Empleando el sistema de prueba de Salmonella typhimurium de Ames, se muestra que los metabolitos del citrato de clomifeno (CC), inducido in vitro, con la fracción hepática de rata S9, producen mutaciones por corrimiento de formato, en las cepas de S. typhimurium TA1538, TA97 y TA98. Utilizando la prueba de Escherichia coli PolA-/PolA+, se demostró que el fármaco o sus derivados son capaces de inducir daño genoletales. Estos daños inducen la depresión del sistema SOS, lográndose la expresión de los genes de profago lamda en la prueba de DeMarini o la expresión de genes de estructurales de colicina E1. Estos datos sugieren que el CC puede actuar como un formador de grandes aductos, induciendo daños de distorsión de la doble hélice y mutaciones por corrimiento de formato, así como lesiones severas que impiden la replicación cuando hay deficiencia de DNA polimerasa, pudiendo inducir los genes regulados por lexA. Consecuentemente, el empleo del CC puede constituir un riesgo genotóxico para el paciente, por lo que es aconsejable realizar una evaluación de riesgo-beneficio, en cada caso particular.

Conocimiento y posibles aplicaciones del estudio de las colicinas / Knowledge and possible aplications of the study of colicins

Las colicinas son sustancias proteicas con actividad bactericida, producidas por miembros de la familia Enterobacteriaceae y que presentan un espectro de acción limitado únicamente a especies de la misma familia. El estudio de las colicinas data desde 1925, aunque su primera clasificación, basada en sus propiedades químicas, físicas y biológicas, fue la realizada en 1948 por Frédériq. Posteriormente, Davies y Reeves en 1975 las dividieron en dos grandes grupos: A y B, de acuerdo con los diferentes patrones de resistencia obtenidos para una serie de mutantes resistentes a cada una de las colicinas conocidas. Se demostró que las mutatantes de resistencia a colicinas del grupo A nunca son resistentes a colicinas del grupo B, y viceversa. Actualmente se han hecho avances notables en el conocimiento del modo de acción de las colicinas. En efecto, se ha determinado que las colicinas pueden actuar en tres formas diferentes: 1) aquellas que actúan específicamente en la membrana celular, induciendo canales dependientes de diferencias de voltaje; 2) las que presentan actividad endonucleolítica, y 3) el caso especial de la colicina M, que es capaz de inhibir específicamente la síntesis de mureína. En general, se ha determinado que el efecto bactericida de las colicinas en las células sensibles precisa de tres partes de la molécula: 1) la unión específica de la colicina con su receptor en la membrana celular externa, que requiere de la parte central de la proteína; 2) la parte -NH2 terminal de la colicina, la cual es necesaria para que ésta atraviese la membrana celular, y 3) la parte -COOH terminal, que es indispensable para el reconocimiento de la colicina con su blanco específico. Las colicinas están codificadas en plásmidos; se han localizado varios de los genes involucrados tanto en la producción de la colicina, como de la proteína de liberación, así como de la proteína que le confiere inmunidad a la célula portadora de dicho plásmido. Los genes estructurales que codifican para dichas proteínas están bajo el control del regulón SOS, que se encuentra reprimido por la proteína LexA. El conocimiento de los plásmido colicinogénicos (factores col+) ha facilitado el desarrollo de la biotecnología, debido a que son multicopia y autorreplicables, por lo que son empleados como vectores de clonación en diferentes estudios del DNA. No obstante el uso más frecuente del conocimiento del fenómeno de colicinogenia en diferentes partes del mundo, ha sido en estudios epidemiológicos Así, se ha establecido que la frecuencia de cepas colicinogénicas es mayor entre los aislados de individuos enfermos, en comparación con los obtenidos de individuos sanos de la misma especie y de la misma ubicación geográfica. Por su parte, la colicina V ha sido ampliamente reconocida como un marcador de patogenicidad entre cepas de Escherichia coli, mientras que la colicina E1 se ha identificado frecuentemente entre sujetos sanos. Por otro lado, a pesar de que las colicinas se han detectado desde hace más de setenta y cinco años, aún no se conocen los efectos biológicos que puedan tener sobre el hospedero humano portador de cepas colinogénicas. Consecuentemente, para establecer si las colicinas pueden conferir alguna ventaja no sólo a las cepas productoras, sino también al hospedero, se requieren aún numerosos trabajos de investigación biomédica